7 Problemas mais comuns do HPLC: Possíveis causas e soluções
Quando surge um problema com o sistema de HPLC, nem sempre é necessário recorrer de imediato à assistência técnica externa. De facto, em algumas situações, aquilo que aparenta ser uma avaria grave no HPLC pode afinal ter uma resolução simples, bastando realizar algumas operações simples para corrigir a origem do problema.
Mesmo quando são cumpridas as boas práticas na utilização do HPLC, podem surgir anomalias. A Cromatografia Líquida de Alta Eficiência envolve um sistema complexo que, por vezes, pode originar problemas. Nessas situações, é importante efetuar uma verificação das possíveis causas para tentar ultrapassar a avaria. Sempre que não for possível corrigir o problema no HPLC deverá, então sim, chamar a assistência técnica.
7 Problemas mais frequentes do HPLC e como os corrigir
Identificámos abaixo as 7 falhas mais recorrentes em sistemas de HPLC, as suas respetivas causas e algumas operações simples que as podem solucionar.
Assim, vai conseguir, em muitos casos, solucionar eventuais anomalias no seu sistema de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência de forma rápida.
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1. Excesso de pressão ou pressão elevada
Causas possíveis |
O que fazer para tentar resolver |
Obstrução dos tubos da fluídica |
Lavar o sistema usando os solventes apropriados |
Precipitação de sais da fase móvel ou da amostra |
Não interromper o fluxo até que a análise de todas as amostras esteja concluída e no final do trabalho lavar o sistema exaustivamente com água |
Obstrução do filtro de linha |
Lavar ou substituir o filtro de linha |
Colmatação do frit ou da coluna | Lavar a coluna segundo as instruções do fabricante |
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2. Erros de reprodutibilidade
Causas possíveis | O que fazer para tentar resolver |
O solvente não foi devidamente desgaseificado | Certificar-se que o desgaseificador está a funcionar, e no modo ON |
Presença de ar na seringa de injeção |
Purgar o sistema até remover todas as bolhas de ar |
Septo do vial danificado ou incompatível |
Substituir as tampas dos vials |
Problema com algum dos componentes do injetor |
Verificar os componentes do injetor e dependendo do modelo, efetuar testes de despiste ou funções automáticas disponíveis no próprio HPLC |
Célula do detetor suja |
Lavar a célula do detetor |
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3. Ruído na linha de base
Causas possíveis |
O que fazer para tentar resolver |
Coluna mal equilibrada |
Aumentar o tempo de estabilização da coluna |
Flutuações de temperatura |
Verificar se o forno de coluna está devidamente operacional |
Fuga na coluna ou no detetor |
Ajustar os parafusos de entrada e de saída |
Célula do detetor suja |
Lavar a célula do detetor |
Fases móveis contaminadas | Voltar a preparar fases móveis frescas |
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4. Ausência de picos ou diminuição da sua intensidade
Causas possíveis |
O que fazer para tentar resolver |
Amostra degradada, contaminada ou indevidamente preparada |
Voltar a preparar as amostras |
Fase móvel incorreta |
Verificar a composição das fases móveis |
Coluna contaminada |
Lavar a coluna |
Perda de eficácia da coluna |
Substituir a coluna |
Fuga na coluna |
Ajustar os parafusos de entrada e de saída |
Lâmpada com baixa energia | Substituir a lâmpada |
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5. Picos desdobrados
Causas possíveis |
O que fazer para tentar resolver |
Solvente de dissolução da amostra inapropriado |
Verificar a solubilidade do solvente na amostra |
Excesso de carga na coluna |
Diluir a amostra a injetar ou injetar menor volume de amostra |
Amostra degradada |
Preparar amostras frescas |
Gradiente inapropriado |
Modificar o gradiente para outras percentagens |
Coluna danificada |
Substituir a coluna |
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6. Desvios nos tempos de retenção
Causas possíveis |
O que fazer para tentar resolver |
Bolhas nas fases móveis. |
Voltar a desgaseificar as fases móveis e por mais tempo. |
Falha nas “checkvalves”. |
Substituir ou lavar as “checkvalves”. |
Fuga de solvente |
Verificar a estanquicidade do sistema. |
Filtros de solvente entupidos. |
Substituir ou lavar os filtros de solvente. |
Filtro de linha entupido. |
Substituir ou lavar o filtro de linha. |
Falta de reprodutibilidade na temperatura. | Verificar a operacionalidade do forno de colunas e do refrigerador de amostras. |
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7. Aumentos nos tempos de retenção
Causas possíveis |
O que fazer para tentar resolver |
Coluna mal equilibrada |
Aumentar o tempo de estabilização da coluna |
Flutuações de temperatura |
Verificar se o forno de coluna está operacional |
Fuga na coluna ou no detetor |
Verificar a estanquicidade do sistema |
Fases móveis contaminadas | Voltar a preparar fases móveis frescas |
O que fazer em caso de Avaria no Sistema HPLC?
Principalmente após períodos de downtime, podem ocorrer anomalias no funcionamento do sistema HPLC do seu laboratório. Um cuidado que ajuda a prevenir estas situações passa pela manutenção preventiva dos seus equipamentos.
Se detetar alguma falha com o HPLC, pode começar por efetuar algumas verificações para identificar a origem da anomalia. Face às causas possíveis há correções que pode fazer para resolver o problema.
No entanto, se não for possível solucionar ou identificar o que poderá estar a provocar a avaria, o melhor será entrar em contacto com a assistência técnica.
Contactar a Assistência Técnica Maldral
2021-08-16