Quando surge um problema com o sistema de HPLC, nem sempre é necessário recorrer de imediato à assistência técnica externa. De facto, em algumas situações, aquilo que aparenta ser uma avaria grave no HPLC pode afinal ter uma resolução simples, bastando realizar algumas operações simples para corrigir a origem do problema.
Mesmo quando são cumpridas as boas práticas na utilização do HPLC, podem surgir anomalias. A Cromatografia Líquida de Alta Eficiência envolve um sistema complexo que, por vezes, pode originar problemas. Nessas situações, é importante efetuar uma verificação das possíveis causas para tentar ultrapassar a avaria. Sempre que não for possível corrigir o problema no HPLC deverá, então sim, chamar a assistência técnica.
Identificámos abaixo as 7 falhas mais recorrentes em sistemas de HPLC, as suas respetivas causas e algumas operações simples que as podem solucionar.
Assim, vai conseguir, em muitos casos, solucionar eventuais anomalias no seu sistema de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência de forma rápida.
| Causas possíveis |
O que fazer para tentar resolver |
| Obstrução dos tubos da fluídica |
Lavar o sistema usando os solventes apropriados |
| Precipitação de sais da fase móvel ou da amostra |
Não interromper o fluxo até que a análise de todas as amostras esteja concluída e no final do trabalho lavar o sistema exaustivamente com água |
| Obstrução do filtro de linha |
Lavar ou substituir o filtro de linha |
| Colmatação do frit ou da coluna | Lavar a coluna segundo as instruções do fabricante |
| Causas possíveis | O que fazer para tentar resolver |
| O solvente não foi devidamente desgaseificado | Certificar-se que o desgaseificador está a funcionar, e no modo ON |
| Presença de ar na seringa de injeção |
Purgar o sistema até remover todas as bolhas de ar |
| Septo do vial danificado ou incompatível |
Substituir as tampas dos vials |
| Problema com algum dos componentes do injetor |
Verificar os componentes do injetor e dependendo do modelo, efetuar testes de despiste ou funções automáticas disponíveis no próprio HPLC |
| Célula do detetor suja |
Lavar a célula do detetor |
| Causas possíveis |
O que fazer para tentar resolver |
| Coluna mal equilibrada |
Aumentar o tempo de estabilização da coluna |
| Flutuações de temperatura |
Verificar se o forno de coluna está devidamente operacional |
| Fuga na coluna ou no detetor |
Ajustar os parafusos de entrada e de saída |
| Célula do detetor suja |
Lavar a célula do detetor |
| Fases móveis contaminadas | Voltar a preparar fases móveis frescas |
| Causas possíveis |
O que fazer para tentar resolver |
| Amostra degradada, contaminada ou indevidamente preparada |
Voltar a preparar as amostras |
| Fase móvel incorreta |
Verificar a composição das fases móveis |
| Coluna contaminada |
Lavar a coluna |
| Perda de eficácia da coluna |
Substituir a coluna |
| Fuga na coluna |
Ajustar os parafusos de entrada e de saída |
| Lâmpada com baixa energia | Substituir a lâmpada |
| Causas possíveis |
O que fazer para tentar resolver |
| Solvente de dissolução da amostra inapropriado |
Verificar a solubilidade do solvente na amostra |
| Excesso de carga na coluna |
Diluir a amostra a injetar ou injetar menor volume de amostra |
| Amostra degradada |
Preparar amostras frescas |
| Gradiente inapropriado |
Modificar o gradiente para outras percentagens |
| Coluna danificada |
Substituir a coluna |
| Causas possíveis |
O que fazer para tentar resolver |
| Bolhas nas fases móveis. |
Voltar a desgaseificar as fases móveis e por mais tempo. |
| Falha nas “checkvalves”. |
Substituir ou lavar as “checkvalves”. |
| Fuga de solvente |
Verificar a estanquicidade do sistema. |
| Filtros de solvente entupidos. |
Substituir ou lavar os filtros de solvente. |
| Filtro de linha entupido. |
Substituir ou lavar o filtro de linha. |
| Falta de reprodutibilidade na temperatura. | Verificar a operacionalidade do forno de colunas e do refrigerador de amostras. |
| Causas possíveis |
O que fazer para tentar resolver |
| Coluna mal equilibrada |
Aumentar o tempo de estabilização da coluna |
| Flutuações de temperatura |
Verificar se o forno de coluna está operacional |
| Fuga na coluna ou no detetor |
Verificar a estanquicidade do sistema |
| Fases móveis contaminadas | Voltar a preparar fases móveis frescas |
Principalmente após períodos de downtime, podem ocorrer anomalias no funcionamento do sistema HPLC do seu laboratório. Um cuidado que ajuda a prevenir estas situações passa pela manutenção preventiva dos seus equipamentos.
Se detetar alguma falha com o HPLC, pode começar por efetuar algumas verificações para identificar a origem da anomalia. Face às causas possíveis há correções que pode fazer para resolver o problema.
No entanto, se não for possível solucionar ou identificar o que poderá estar a provocar a avaria, o melhor será entrar em contacto com a assistência técnica.
Contactar a Assistência Técnica Maldral